Jucătorii sunt prinși într-o închisoare în care fiecare cameră are 4 uși dar se pare că nicio iesire. Ei trebuie să caute Camera 25, presupusa ieșire din acest coșmar. Problema e că unii dintre jucători pot fi gardieni ai închisorii care așteaptă momentul ideal de atac.
În jocul cooperativ Room 25, nu toată lumea vrea să scape din închisoare - dar oare cine este trădătorul? Pe tură, mișcările jucătorilor sunt programate și va fi nevoie de multe discuții, negocieri și trădare.
Room 25 include 5 moduri diferite de joc, de la joc cooperativ la mod single player.